WesternBlot结果出乎意料,有
导读
您上一次何时更换的转印海绵垫?答案可能是“从不”。因为如果转印有效,为什么要更换?只有当海绵变成灰色和块状时,才会想起来更换。
但是具有多年WesternBlot经验的Azure技术专家对定期更换转印海绵垫给出了必要性的解释,我们来具体看一看:
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★为什么更换海绵垫很重要?★
转印问题的常见根源是三明治结构的松紧度。三明治结构一定要紧!请定期更换转印海绵垫,以确保实验结果的准确性。使用额外的滤纸来填补海绵的磨损,可能会导致传输不一致。
我们都会定期更换海绵垫,因为它们会吸收污染物,随着时间的推移,转印海绵垫也会被污染。使用干净的海绵垫对荧光应用尤为关键,因为这些污染物会产生自发荧光,从而导致高背景。
★多久更换一次?★
更换的频率取决于您做蛋白WesternBlot的频率。如果您在繁忙的实验室中工作,并且有许多WesternBlot实验,最好每月更换一次海绵。
★什么情况下需要更换?★
如果您的实验没有其他改变,但结果在您的预料之外,海绵垫可能是罪魁祸首。破损的海绵垫可能导致转印不一致,信号减弱以及蛋白的消失。
使用旧的脏的海绵垫做荧光WesternBlot。
沉积在膜上污染物在Cy3通道产生自发荧光
图A:旧的海绵垫结果图
图B:新海绵垫结果图
旧的海绵垫,三明治结构不紧密。
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